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 ELISA試劑盒室內(nèi)質(zhì)量控制程序
臨床檢驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果，每次或每天之間不可能*。決定允許的誤差范圍，以臨床上不造成誤診與漏診為準(zhǔn)，通過(guò)以下步驟來(lái)確定質(zhì)控范圍。
1） *條件下的測(cè)定誤差。
2） 已知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差。
3） 未知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差。
4） 臨床應(yīng)用的要求。對(duì)任何一個(gè)試驗(yàn)都應(yīng)確定一個(gè)允許的誤差范圍，前題是滿足臨床要求。如允許誤差定得過(guò)小，在臨床上不存在任何意義，但為了符合該規(guī)定卻要花費(fèi)很大人力、物力和時(shí)間。相反，如果將允許誤差定得過(guò)大，將使監(jiān)測(cè)系統(tǒng)察覺(jué)不到臨床上要求檢出的誤差，失去質(zhì)控的意義。

1 *條件下已知值質(zhì)控血清變異（optimal conditions variance,簡(jiǎn)稱OCV）的測(cè)定
在本實(shí)驗(yàn)室*條件下（包括操作者、試劑、儀器等）檢測(cè)質(zhì)控血清20-30次，測(cè)得結(jié)果計(jì)算，求出該組數(shù)據(jù)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示該實(shí)驗(yàn)室的*工作質(zhì)量。
現(xiàn)舉例說(shuō)明HBsAg ELISA法檢測(cè)時(shí)OCV的測(cè)定。使用的質(zhì)控制血清為臨界血清，HBsAg濃度為5ng/ml。在該實(shí)驗(yàn)室中選擇素質(zhì)、操作zui熟練的技術(shù)員進(jìn)行認(rèn)真地專門測(cè)定，選用*的試劑盒，檢測(cè)之前，將恒箱、加樣器等認(rèn)真校正、調(diào)校正、調(diào)試，使用新的加樣吸頭等，即在*、的條件下進(jìn)行檢測(cè)。除質(zhì)控血清外同時(shí)測(cè)定陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品。并作雙份測(cè)定，得出2個(gè)吸光值（A值），求出X。連續(xù)作20次，求出20個(gè)X，即X1……X20。從這20個(gè)數(shù)據(jù)中，求出OCV的X和SD。

2常規(guī)條件下已知值質(zhì)控血清變異（routine conditions variance-known value,簡(jiǎn)稱　　RCVK）的測(cè)定。
做常規(guī)檢驗(yàn)的技術(shù)人員，在常規(guī)檢驗(yàn)的條件下，將質(zhì)控血清放在常規(guī)檢測(cè)樣本中，進(jìn)行20次檢驗(yàn)，結(jié)果計(jì)算同OCV法。一般認(rèn)為RCV的SD在OCV的SD兩倍范圍內(nèi)可以接受。
若太大應(yīng)該查找原因，使其向OCV的SD值靠近。在改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室條件后（例如較正加樣器，糾正洗板操作，調(diào)正溫育溫度等），重新進(jìn)行RCVK的測(cè)定。如果RCVK的SD值更小，說(shuō)明OCV不是*條件下測(cè)定的，應(yīng)重新再測(cè)OCV。常規(guī)條件下，RCVK肯定要比OCV大。通過(guò)質(zhì)控控制各項(xiàng)條件，使RCVK的數(shù)據(jù)盡可能接近OCV值。RCVK的數(shù)據(jù)反映該實(shí)驗(yàn)室日常工作的質(zhì)量，用于作質(zhì)控圖，對(duì)室內(nèi)檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行控制，每日檢驗(yàn)的結(jié)果，報(bào)告能否發(fā)出。

3常規(guī)條件下,未知值質(zhì)控血清變異（routine conditions variancl-unknown value 簡(jiǎn)稱　　RCVU）的測(cè)定
有時(shí)為了避免主觀性,再作RCVU測(cè)定。
測(cè)定步驟同RCVK，但檢測(cè)的操作者不知質(zhì)控血清的定值，或在操作者不知哪份是質(zhì)控血汪清的條件下進(jìn)行常規(guī)檢驗(yàn)，以排除操作者的主觀性。在此不再舉例說(shuō)明。

4質(zhì)控圖
通過(guò)以上三步驟，可以開(kāi)始作室內(nèi)質(zhì)控圖，根據(jù)RCVK的和SD作質(zhì)控框圖。利用質(zhì)控圖可以對(duì)每次檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行監(jiān)測(cè)，當(dāng)沒(méi)有更換另一批號(hào)試劑盒和另一批號(hào)質(zhì)控血清時(shí)，該質(zhì)控圖可以連續(xù)作下去。
 ELISA試劑盒質(zhì)控血清的S/CO值低于-2SD的范圍,屬"告警"，應(yīng)尋找原因并在質(zhì)控圖上記錄查出的原因。

　　ELISA試驗(yàn)中，各種檢驗(yàn)項(xiàng)目的誤差允許范圍均有待在實(shí)踐中得出結(jié)論，以上只是舉例說(shuō)明質(zhì)控方法，不是定論。2SD是一般*的允許誤差限度。每批測(cè)定放一份質(zhì)控血清時(shí)，一次超過(guò)2SD應(yīng)作為"告警"，二次超出2SD為"失控"。當(dāng)質(zhì)控過(guò)程中，出現(xiàn)失控時(shí)，出現(xiàn)失控時(shí)，應(yīng)查找原因，通常是試劑盒或質(zhì)控血清失效造成。更換試劑盒或更換質(zhì)控血
清，找出原因糾正后重新檢驗(yàn)。如果檢驗(yàn)結(jié)果仍達(dá)不到要求或找不到原 因時(shí)，應(yīng)重復(fù)進(jìn)行OCV的檢驗(yàn)。如果OCV檢驗(yàn)的結(jié)果仍是好的，說(shuō)明常規(guī)操作出現(xiàn)問(wèn)題。
一般認(rèn)為：①一次超出3SD；②連續(xù)二次超出2SD；③3-5次連續(xù)處于一側(cè)的2SD之內(nèi)；　　　　　④5～7次連續(xù)偏向橫軸的一側(cè)，均為失控。
第③、④種情況，單獨(dú)依靠記錄往往是不易察覺(jué)的，但在質(zhì)控圖上可以清晰地發(fā)現(xiàn)這種失控。

5統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算方法--"即刻性"質(zhì)控
以上介紹的質(zhì)控方法基本上與臨床化學(xué)測(cè)定的質(zhì)控方法相同，但ELISA有其特殊性，zui合適的質(zhì)控方法尚待研究建立。有些實(shí)驗(yàn)室不是每天進(jìn)行ELISA項(xiàng)目的檢驗(yàn)，而ELSIA試劑盒效期短，用一批號(hào)試劑盒連續(xù)常規(guī)測(cè)20次，難度較大。采用"即刻法"質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法，只需連續(xù)測(cè)3次，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。
"即刻法"的建立具體計(jì)算方法如下：
1）先將測(cè)定值從小到大排列
2）計(jì)算X和SD。
3）計(jì)算SDI上限和SDI下限值。
4）將SDI上限、SDI下限值與SDI值中的數(shù)字比較。當(dāng)SDI上限值和SDI下限值＜n2SD時(shí)，表　示處于控制范圍內(nèi)，可以繼續(xù)往下測(cè)定，繼續(xù)重復(fù)以上各項(xiàng)計(jì)算；當(dāng)SDI上限和SDI下限有 一值處于n2SD和n2SD值之間時(shí)，說(shuō)明該值在2SD~3SD范圍，處于"告警"狀態(tài)；當(dāng)SDI上限和SDI下限有一值＞n2SD時(shí)，說(shuō)明該值已在3SD范圍之外，屬"失控"。數(shù)值處于"告警"和"失控"狀態(tài)應(yīng)舍去，重新測(cè)定該項(xiàng)質(zhì)控血清和病人樣本。舍去的只是失控的這次數(shù)值，其他次測(cè)定值仍可繼續(xù)使用。
即刻性質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法，適于ELISA測(cè)定的質(zhì)控。
 ELISA試劑盒當(dāng)檢測(cè)的數(shù)值超過(guò)20次以后，不必再使用"即刻法"質(zhì)控統(tǒng)計(jì)計(jì)算，可以轉(zhuǎn)入常規(guī)的質(zhì)控圖的質(zhì)控。將前20次的數(shù)值求出的和SD作質(zhì)控框架圖，第21次的數(shù)值，依次點(diǎn)入即可。